El uso de las defensas antioxidantes mitocondrial de rescate de células con una óptica hereditaria de Leber neuropatía que causan mutación.

Qi X, Sun L, Hauswirth WW, Lewin AS, Guy J.
Department of Ophthalmology, College of Medicine, University of Florida, Gainesville, FL 32610, USA. Departamento de Oftalmología de la Facultad de Medicina, Universidad de Florida, Gainesville, FL 32610, EE.UU..
OBJECTIVE: To explore a treatment paradigm for Leber hereditary optic neuropathy (LHON), we augmented mitochondrial antioxidant defenses to rescue cells with the G11778A mutation in mitochondrial DNA. OBJETIVO: explorar un paradigma para el tratamiento Leber neuropatía óptica hereditaria (LHON), aumentar las defensas antioxidantes mitocondrial para rescatar a las células con la mutación G11778A en el ADN mitocondrial. METHODS: Cells homoplasmic for the G11778A mutation in mitochondrial DNA were infected with an adeno-associated viral vector containing the human mitochondrial superoxide dismutase (SOD2) gene. MÉTODOS: Las células homoplasmic para la mutación G11778A en el ADN mitocondrial fueron infectados con un adeno-asociado vector viral humano que contengan la superóxido dismutasa mitocondrial (SOD2) de genes. Control cells were infected with an adeno-associated viral (AAV) vector expressing the green fluorescent protein (GFP). Control de las células estaban infectadas con un adeno-virales asociados (AAV) vector que expresa la proteína verde fluorescente (GFP). Two days later, the high-glucose culture medium was exchanged for a glucose-free medium containing galactose. Dos días más tarde, el alto de glucosa en medio de cultivo se intercambió por una de glucosa libre de soporte de galactosa. After 1 or 2 days, cellular production of superoxide was assessed using the fluorescent probe dihydroethidium, and we used TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated biotin-deoxyuridine triphosphate nick-end labeling) staining to detect apoptotic nuclei. Después de 1 o 2 días, celulares producción de superóxido se evaluó mediante la sonda fluorescente dihydroethidium, y hemos utilizado TUNEL (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase mediada por biotina-trifosfato desoxiuridina nick-end etiquetado) tinción para detectar los núcleos apoptóticos. The effect of SOD2 on LHON cell survival was quantitated after 2 or 3 days. El efecto de SOD2 en LHON la supervivencia celular fue su cuantificación después de 2 o 3 días. RESULTS: Comparisons of AAV-SOD2-infected LHON cells relative to control cells infected with AAV-green fluorescent protein showed increased expression of mitochondrial SOD that attenuated superoxide-induced fluorescence by 26% (P = .003) and suppressed TUNEL-induced fluorescence by 21% (P = .048) after 2 days of growth in galactose medium, when cell survival increased by 25% (P=.05). RESULTADOS: La comparación de AAV-SOD2-LHON células infectadas en relación con el control de las células infectadas con el AAV-proteína verde fluorescente mostraron incremento en la expresión de SOD mitocondrial que superóxido-atenuadas mediante fluorescencia inducida por el 26% (P = .003) y reprimidas TUNEL-fluorescencia inducida por 21% (P = .048) después de 2 días de crecimiento en galactosa medio, cuando la supervivencia celular aumentó un 25% (P =. 05). After 3 days in galactose medium, SOD2 increased LHON survival by 89% (P = .006) relative to controls. Después de 3 días en medio galactosa, SOD2 aumento LHON supervivencia de 89% (P = .006) en relación con los controles. CONCLUSION: Protection against mitochondrial oxidative stress may be useful for treatment of LHON. CONCLUSIÓN: la protección contra el estrés oxidativo mitocondrial puede ser útil para el tratamiento de LHON. CLINICAL RELEVANCE: Gene therapy with antioxidant genes may protect patients with LHON against visual loss. Relevancia clínica: La terapia génica con genes antioxidantes pueden proteger a los pacientes con LHON contra la pérdida visual.
PMID: 17296905 [PubMed - indexed for MEDLINE] PMID: 17296905 [PubMed - indexado para MEDLINE]